A la edad de 18 años, William Shakespeare se casó con una mujer llamada Anne Hathaway. Anne y su familia eran los inquilinos de una casa de campo de una sola planta en una granja de 90 acres enShottery. La casa está a menos de un kilómetro y medio del hogar en el que Shakespeare nació y creció. Los descendientes de Hathaway mantuvieron la casa de campo en constante expansión en la familia durante 13 generaciones hasta que fue adquirida por el Shakespeare Birthplace Trust en 1892 y convertida en un museo.
El padre de Anne era un granjero y, en consecuencia, un miembro muy respetado de la comunidad de Shottery. A su muerte, dejó a Anne, también conocida como Agnes, una pequeña suma de dinero con la que pudo casarse. La casa fue entonces comprada por el hermano de Anne, Bartholomew, que también adquirió la propiedad de la granja.
Anne se casó con William Shakespeare a finales de 1582, cuando William tenía 18 años. No se conoce la fecha exacta de nacimiento de Anne, pero se cree que tenía 26 años cuando se casaron. Lo que sí sabemos es que Ana estaba embarazada de tres meses en el momento de su matrimonio. Guillermo y Ana podrían haber «prometido su vida» en una ceremonia de ayuno de manos, que tradicionalmente se celebraba el día de Lammas (1 de agosto), en la que se presenciaba un intercambio de votos y la pareja se acostaba, antes de la boda oficial por la iglesia. Para evitar el escándalo, era importante que la boda se celebrara antes de que los signos del embarazo fueran demasiado obvios, por lo que Guillermo aceleró los trámites presentando una solicitud al tribunal del obispo en Worcester. Dos granjeros de Shottery acompañaron a Guillermo al tribunal para que actuaran como garantes de la suma de 40 libras, que tendrían que pagar si el matrimonio resultaba inválido. Tras la boda, Anne se trasladó con Shakespeare y sus padres a vivir en la casa familiar de Henley Street.
Se sabe muy poco de la relación entre Anne y William, pero lo único que podemos decir con certeza es que se casaron, tuvieron tres hijos juntos, Susanna, Judith y Hamnet, y permanecieron casados hasta la muerte de Shakespeare en 1616. A su muerte, Shakespeare dejó su «segunda mejor cama» a Anne en su testamento.
Anne Shakespeare murió en 1623.