ARTICLE ORIGINAL
Le stockage de l’urine sous réfrigération préserve l’échantillon dans les analyses chimiques, cellularité et bactériurie de l’ACS
L’entreposage de l’urine, sous réfrigération, préserve l’échantillon dans les analyses chimiques, cellulaires et de bactériurie de l’ACS
Karen Cristina Barcellos RibeiroI ; Bruno Rotondo Levenhagem SerabionII ; Eduardo Lima NolascoIII ; Chislene Pereira VanelliIV ; Harleson Lopes de MesquitaV ; José Otávio do Amaral CorrêaVI
IPharmacien à l’hôpital Universitário Sul Fluminense
IIGradué en pharmacie par l’Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF)
IIIDoctorant en sciences pharmaceutiques au laboratoire d’immunoendocrinologie-. Département d’analyse clinique et toxicologique Faculté des sciences pharmaceutiques- Universidade de São Paulo (USP)
IVNutritionniste clinique au Centro de Tratamento de Doenças Renais et Fundação Imepem ; étudiant en MSc en santé brésilienne à l’UFJF
VMSc en analyse clinique par l’Universidade Santo Amaro (UNISA) ; professeur adjoint à la Faculdade Suprema ; doctorant en santé brésilienne à l’UFJF
VIPhD en pathologie par l’Universidade Federal Fluminense (UFF) ; professeur adjoint et coordinateur du cours de pharmacie à l’UFJF
Adresse postale
ABSTRACT
INTRODUCTION : L’analyse des constituants anormaux et du sédiment urinaire (ACS) comprend des tests de grande valeur diagnostique et pronostique dans la pratique clinique. Lorsque l’analyse des SCA ne peut être effectuée dans les deux heures suivant le prélèvement, l’échantillon doit être conservé afin d’éviter les interférences pré-analytiques. La réfrigération est la technique la plus appliquée en raison de son rapport coût-efficacité. De plus, elle présente moins d’inconvénients par rapport à la conservation chimique. Cependant, des modifications de l’AEC peuvent également se produire dans les échantillons sous réfrigération.
OBJECTIF : Analyser l’influence de la réfrigération à 2 à 8ºC sur la conservation des échantillons d’urine dans les 24 heures.
MATERIEL ET METHODE : Un total de 80 échantillons d’urine ont été sélectionnés chez des patients admis à l’hôpital universitaire Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF), qui ont été testés pour l’AEC à température ambiante et conservés sous réfrigération pendant 6, 12 et 24 heures.
RESULTATS : Les résultats ont montré que la réfrigération s’est avérée efficace par rapport aux échantillons conservés à température ambiante, dans la mesure où les caractéristiques physiques, chimiques, microbiennes et la cellularité ont été préservées. Néanmoins, la cristallurie était présente après une période de stockage de 6 heures.
CONCLUSION : Les tests ont révélé que le refroidissement préservait la cellularité et les caractéristiques chimiques des échantillons d’urine jusqu’à 12 heures. Néanmoins, la précipitation de cristaux était évidente dans cette méthode de stockage. Ainsi, les conséquences possibles du stockage des échantillons d’urine pour le test AEC dans ces conditions devraient être incluses dans le rapport d’analyse.
Mots clés : analyse d’urine ; stockage d’urine ; cristallurie ; pyurie ; hématurie Introduction.
RESUMO
INTRODUÇÃO : Les éléments anormaux des urines et la sédimentoscopie (EAS) sont des tests d’une grande valeur diagnostique et pronostique dans la pratique clinique. Lorsque l’analyse du SAE ne peut être effectuée dans les deux heures suivant le prélèvement de l’échantillon, celui-ci doit être conservé afin d’éviter les interférences pré-analytiques. La réfrigération est la technique la plus utilisée en raison de son rapport coût-efficacité et parce qu’elle présente moins d’inconvénients par rapport aux conservateurs chimiques. Cependant, des changements dans l’EAS peuvent également se produire dans l’échantillon sous réfrigération.
OBJECTIF : Analyser l’influence de la réfrigération entre 2 et 8°C sur le stockage de l’EAS pour une période allant jusqu’à 24 heures.
MATERIEL ET METHODES : Quatre-vingts échantillons d’urine ont été sélectionnés parmi les patients admis à l’hôpital de l’Université fédérale de Juiz de Fora (UFJF) testés pour l’EAS à température ambiante et conservés sous réfrigération à 6, 12 et 24 heures.
RESULTATS : Les résultats ont montré que la réfrigération était efficace par rapport aux échantillons conservés à température ambiante, puisque les caractéristiques physiques, chimiques, la cellularité et le microbiote de l’urine étaient préservés. Cependant, une cristallurie était présente dès 6 heures de stockage.
CONCLUSION : Les tests ont démontré que la réfrigération préservait les caractéristiques chimiques et la cellularité de l’urine jusqu’à 12 heures. Cependant, la précipitation des cristaux était évidente dans cette méthode de stockage. Ainsi, la suggestion de signaler dans le rapport les conséquences possibles de cette forme de stockage de l’urine pour les SAE peut être importante…..
Unitermes : uroanalyse ; stockage d’urine ; cristallurie ; pyurie ; hématurie.
INTRODUCTION
L’analyse d’urine de routine ou analyse d’urine est un outil de laboratoire essentiel dans la pratique clinique. L’un des tests d’analyse d’urine les plus importants est le dépistage des constituants anormaux et des sédiments (ACS). Le test ACS comprend une analyse physique (caractéristiques organoleptiques, volume et densité), chimique et microscopique du sédiment urinaire (2, 5, 7). Il s’agit d’un test peu coûteux et couramment disponible, qui fournit une quantité considérable d’informations utiles sur le diagnostic des troubles du métabolisme et des voies génito-urinaires(1, 3).
Plusieurs conditions cliniques systémiques susceptibles d’affecter la fonction rénale et/ou de modifier la composition de l’urine, à savoir l’état d’hydratation, la progression et le diagnostic du diabète, l’hépatopathie, l’anémie hémolytique ou l’empoisonnement, peuvent avoir plus de chances d’être diagnostiquées et/ou surveillées par l’analyse de l’ACS(2, 4-6). En outre, l’évaluation de l’AEC est vitale pour détecter les maladies du système rénal et urogénital telles que la glomérulonéphrite, le syndrome néphrotique, la cystite, la pyélonéphrite, l’insuffisance rénale, la lithiase et même le cancer(2, 6).
Dans les laboratoires de pathologie clinique, toutes les procédures d’analyse, y compris les tests urinaires, sont divisées en phases pré-analytique, analytique et post-analytique(8, 17). La phase pré-analytique est l’étape dans laquelle des procédures fondamentales sont requises afin de garantir la qualité et la performance du service. Elle comprend le prélèvement, la manipulation, le traitement, la livraison de l’échantillon aux analyseurs et le stockage lorsqu’il n’est pas traité à son arrivée au laboratoire. Elle représente également 46% à 70% des erreurs de laboratoire, qui peuvent conduire à des résultats inexacts, entravant ainsi le diagnostic clinique et les soins de santé du patient(8, 9, 11, 18).
Par conséquent, la collecte d’urine (phase pré-analytique) doit respecter des procédures de base afin d’obtenir un échantillon qui reflète les changements physicochimiques, cellulaires et microbiologiques(2, 7). L’idéal est de recueillir l’échantillon après avoir nettoyé l’appareil génito-urinaire par une urine spontanée et de préférence longue, à mi-course, après une concentration nocturne (première miction du matin). L’envoi et l’analyse de l’échantillon doivent avoir lieu dans les deux heures qui suivent le prélèvement s’il est conservé à température ambiante(7, 12).
Selon l’Association brésilienne des normes techniques (Associação Brasileira de Normas Técnicas- ABNT)(2), lorsque l’analyse ne peut pas être réalisée dans ce délai, des conservateurs doivent être utilisés afin de conserver les caractéristiques de l’urine et d’éviter des résultats d’analyse inexacts. Les principaux facteurs directement ou indirectement liés à l’état du patient qui sont capables de modifier les résultats de l’analyse AES sont les suivants : les médicaments, les vitamines, les exercices physiques, le régime alimentaire et une mauvaise conservation des échantillons(2, 5).
De nombreuses situations ne permettent pas l’analyse dans les deux heures suivant la miction, par conséquent, la conservation de l’échantillon d’urine devient une étape pré-analytique couramment appliquée afin d’éviter les interférences précédemment mentionnées. Il existe plusieurs conservateurs qui présentent des avantages et des inconvénients : l’acide borique, le chloroforme, le phénol, le formol, le toluène, le thymol et la réfrigération à 2 à 8ºC, qui est la méthode la plus largement appliquée(2, 7, 13) en raison de son rapport coût-efficacité et de ses inconvénients moindres par rapport aux conservateurs chimiques(2, 12, 13).
L’utilisation de la réfrigération peut entraîner des changements dans les SCA qui incluent la densité, la précipitation de cristaux et même des altérations cellulaires(2, 13, 15). De plus, la durée de la période d’efficacité du refroidissement est controversée, dans la mesure où certains auteurs affirment qu’elle est de 12 heures(2), alors que d’autres recommandent jusqu’à 24 heures(12).
OBJECTIFS
La présente étude visait à vérifier l’influence de la réfrigération à 2 à 8ºC sur le stockage des urines pendant 24 heures avant l’analyse des AEC. Les échantillons réfrigérés ont été comparés à ceux conservés à température ambiante pour la réalisation des analyses physiques, chimiques et microscopiques de l’AEC.
MATERIEL ET METHODE
Patient et échantillons
Les échantillons d’urine ont été obtenus auprès de patients adultes âgés de 18 à 60 ans des deux sexes, hospitalisés à l’Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF) – hôpital universitaire et ayant fait l’objet d’une demande de test ACS.
80 échantillons d’urine contenant 80 ml chacun provenaient d’une collecte d’urine ponctuelle à mi-courant propre après concentration nocturne. Ils ont été conservés dans des récipients normalisés par l’Organisation mondiale de la santé (OMS) et immédiatement expédiés au secteur d’analyse urinaire du laboratoire d’analyse clinique de l’hôpital universitaire UFJF et analysés à l’arrivée.
Après la réalisation du test AEC, les échantillons ont été divisés et conservés à différentes températures (réfrigération entre 2 et 8ºC et à température ambiante). De plus, ils ont été évalués à différentes périodes (6, 12 et 24 heures).
Toutes les procédures de recherche ont été approuvées par le comité de recherche et d’éthique de l’UFJF – Hospital Universitário – Centro de Atenção à Saude (numéro : 0085.0.420.000-10). Le laboratoire dispose d’un contrôle de qualité externe selon les normes de la Société brésilienne de pathologie clinique (Sociedade Brasileira de Patologia Clínica).
Stockage
Après la réalisation du test ACS à l’arrivée immédiate, le volume d’urine restant (70 ml) a été divisé en deux flacons qui ont été stockés pendant 24 heures selon différentes procédures : l’un a été stocké au réfrigérateur et l’autre a été conservé à température ambiante. La température du réfrigérateur a été ajustée entre 2 et 8ºC avec un contrôle temporel par thermomètre maximum et minimum tout au long de l’expérience. Le test ACS a été effectué à nouveau.
ACS
Une fois le matériel collecté, l’aliquote de 10 ml d’urine a été appliquée pour analyse. L’examen physique a été effectué en observant la couleur, la densité, l’aspect et l’odeur. La densité a été évaluée à l’aide d’un réfractomètre, qui a été soumis à un étalonnage avec de l’eau distillée après chaque analyse.
L’analyse chimique a été réalisée à l’aide de bandelettes réactives (UriquestPlus®) afin de détecter la présence de leucocytes, de nitrites, de protéines, de sang, de bilirubine, d’urobilinogène, de corps cétoniques, de glucose ainsi que le contrôle du pH. Après homogénéisation, les zones réactives ont été immergées dans l’urine fraîche et immédiatement retirées pour éviter la dissolution du réactif de la bandelette. Pendant que la bandelette était retirée de l’urine, l’excès était drainé pour éviter le mélange des produits chimiques. Le temps spécifique de réaction pour chaque paramètre analysé a été observé et, par la suite, il a été soigneusement comparé à l’étiquette du produit.
Une fois l’analyse chimique effectuée, une microscopie a été réalisée à l’aide d’un microscope optique commun, suivie d’une centrifugation de 10 ml d’urine à 1 500 tours par minute pendant 5 minutes. Ensuite, le surnageant a été retiré et le sédiment a été remis en suspension et transféré sur une lame. Après cela, nous avons procédé à l’analyse microscopique à 100 × 400 et ×. Le sédiment a été évalué afin de vérifier la présence d’éléments tels que des cristaux, du mucus, de la coulée rénale, des cellules, des bactéries et des levures, entre autres. Les procédures susmentionnées ont été adoptées dans toutes les analyses d’échantillons et réalisées après 6, 12 et 24 heures. Il est particulièrement utile de mentionner que les échantillons réfrigérés ont atteint la température ambiante avant d’être manipulés dans chacune de ces étapes.
Pyurie et hématurie évaluées dans l’ACS
Vingt échantillons d’urine qui ont montré plus de cinq pyocytes et / ou des globules rouges / champ microscopique ont été sélectionnés pour évaluer la pyurie et l’hématurie. En conséquence, 10 ml d’urine ont été centrifugés à 1500 rpm pendant 5 minutes. Sans agitation et sans remettre en suspension le sédiment, les 9 ml supérieurs ont été retirés et le 1 ml restant a été homogénéisé et placé dans la chambre de Newbauer. Ensuite, les pyocytes et les globules rouges ont été comptés comme décrit dans la littérature(17). Le résultat a été publié avec le nombre de globules rouges ou de pyocytes/ml. Tant le test AEC que la quantification des pyocytes et des globules rouges ont été réalisés par trois analystes formés, qui ont adopté les mêmes critères.
Analyse statistique
Les procédures statistiques ont été employées à l’aide du logiciel Graph Pad Prism, version 5.0, par analyse de la variance (ANOVA), suivie du test de Tukey, avec un niveau de signification de 5%. Les données ont été exprimées en moyenne ± erreur standard de la moyenne (SEM).
RESULTATS
Dans un premier temps, les analyses physiques (couleur, aspect et densité) de 80 échantillons d’urine ont été réalisées. La figure 1 montre que les échantillons d’urine qui étaient à température ambiante et ceux qui étaient réfrigérés ne présentaient pratiquement aucune différence en termes de couleur. Néanmoins, après 24 heures à température ambiante, quatre échantillons ont changé de teinte, passant du jaune au jaune foncé (3) et au rouge (1).
En ce qui concerne l’aspect (figure 2), 38 des 80 échantillons d’urine, qui avaient été conservés à température ambiante, étaient clairs au moment du prélèvement et 31 sont restés avec le même aspect pendant toute la période d’analyse. Les 7 échantillons restants sont devenus troubles lors des analyses effectuées après 24 heures. Un résultat complètement différent a été observé dans les échantillons conservés sous réfrigération. Dans cette méthode de stockage, il a été observé qu’après une période de réfrigération de six heures, certains échantillons sont devenus troubles ou légèrement troubles, bien que la plupart d’entre eux soient restés clairs. Lors des analyses effectuées 12 et 24 heures après le prélèvement, on a constaté une inversion du profil avec une prédominance des caractéristiques troubles et légèrement troubles. Ainsi, au temps zéro, 38 échantillons étaient limpides et seulement 11 échantillons présentaient cette caractéristique à la fin de la période de réfrigération de 24 heures.
En ce qui concerne l’analyse de la densité, on a observé que tous les échantillons, réfrigérés ou non, ont donné des résultats compris entre 1,005 et 1,035. 9 des 80 échantillons conservés à température ambiante ont démontré une augmentation maximale de 0,010 unité. Concernant les échantillons conservés sous réfrigération, seuls 3 ont montré une augmentation de la densité de 0,005.
Dans l’évaluation chimique, il a été observé que 45 des 80 échantillons d’urine sélectionnés n’ont montré aucun changement chimique détecté par la bandelette réactive lorsqu’ils ont été analysés à température ambiante au moment du prélèvement. Même après réfrigération, ces 45 échantillons n’ont présenté aucun changement chimique, corroborant les données présentées au cours de cette étude. Ainsi, la réfrigération n’a exercé aucun effet sur l’analyse chimique, ce qui pourrait conduire à une positivité.
Dans les 35 échantillons restants, un ou plusieurs éléments anormaux ont été détectés sur les bandes réactives immédiatement après le prélèvement (tableau 1). Dans ces échantillons présentant des changements chimiques, qui avaient été conservés sous réfrigération et analysés après des périodes de 6, 12 et 24 heures, il n’y avait pas de changement qualitatif ou semi-quantitatif dans le dépistage en contraste avec l’analyse à l’arrivée au laboratoire.
En ce qui concerne les échantillons conservés à température ambiante, le tableau 2 montre des changements dans certains paramètres chimiques en contraste avec les résultats obtenus à partir de ceux immédiatement analysés. Lors de l’analyse après 24 heures, les trois échantillons ont commencé à présenter une réaction positive aux nitrites, deux étaient négatifs pour les leucocytes et un était négatif pour le glucose.
En ce qui concerne le pH des 80 échantillons conservés sous réfrigération et évalués par les bandes réactives, il y a eu un changement de pH de 6,0 à 7,0 dans un seul échantillon. À l’inverse, dans les échantillons conservés à température ambiante (tableau 3), il y a eu un changement dans 9 d’entre eux, principalement 24 heures après le prélèvement.
Après les analyses physiques et chimiques, le dépistage par ACS des éléments formés dans les échantillons d’urine réfrigérés n’a révélé aucune différence dans les résultats des cellules épithéliales, du nombre de pyocytes, des érythrocytes et des bactéries par rapport aux échantillons évalués au moment du prélèvement.
En revanche, une augmentation des cristaux de sédiments urinaires proportionnelle à la période de refroidissement a été observée au cours de l’analyse qualitative et semi-quantitative, notamment des cristaux d’oxalate de calcium, d’urate et de phosphate amorphe (tableau 4). Au départ, seuls 7 des 80 échantillons présentaient des cristaux. A la fin de la période de refroidissement de 24 heures, 36 échantillons d’urine présentaient des cristaux précipités et plusieurs avec plus d’un type de cristaux. Lorsqu’ils ont été conservés à température ambiante pendant 24 heures, le nombre d’échantillons présentant des cristaux au moment de la collecte est passé de 7 à 10 avec précipitation des cristaux.
En ce qui concerne l’urine conservée à température ambiante, l’analyse de la pyurie par microscopie a révélé que le nombre de cellules a diminué au cours de la période de 12 heures. Initialement, 6 échantillons présentaient 5 à 10 pyocytes /champ et seulement 3 sont restés avec le même nombre à la fin de la période de 24 heures. 6 des 8 échantillons d’urine qui présentaient 10 à 20 pyocytes/champ sont restés avec le même nombre après 12 heures et ce total a chuté à 5 échantillons à la fin de la période de 24 heures.
En ce qui concerne l’hématurie, 10 échantillons ont présenté des valeurs supérieures à 4 érythrocytes/champ, ce qui est établi comme la valeur normale dans le laboratoire clinique de l’hôpital universitaire. Ceci a été corroboré par les résultats de la bandelette urinaire qui ont montré 9 échantillons positifs. Lorsque les échantillons ont été conservés à température ambiante et analysés après 6 heures, une baisse significative de l’hématurie a été observée, dans la mesure où seuls 2 des 5 échantillons contenant 5-10 érythrocytes rouges/champ sont restés avec le même nombre. Dans les autres échantillons d’urine dont les résultats allaient de plus de 10/champ jusqu’à de nombreux érythrocytes/champ, on a également constaté une diminution considérable du nombre après les six premières heures. Cette réduction n’a pas été observée dans les échantillons d’urine conservés sous réfrigération, même après 24 heures.
Dans les échantillons conservés à température ambiante, 10 échantillons ont présenté une bactériurie significative après 12 heures, augmentant à 14 échantillons après 24 heures, alors que les 8 échantillons d’urine qui présentaient initialement des bactéries n’ont subi aucun changement.
Les résultats de l’analyse quantitative des pyocytes ont révélé qu’il n’y avait pas de changements statistiquement significatifs (p > 0,05) dans les échantillons conservés sous réfrigération, même après 24 heures par rapport aux comptages obtenus dans les échantillons d’urine analysés au moment de la collecte. Conservés à température ambiante, les échantillons d’urine analysés ne présentaient une réduction significative (p < 0,05) du nombre de pyocytes que 24 heures après le prélèvement (Figure 3).
Nous avons également effectué une analyse quantitative des globules rouges (Figure 4) conservés sous réfrigération et on a constaté une réduction substantielle (p < 0,01) seulement après 24 heures. Dans les échantillons conservés pendant 24 heures sans réfrigération, les résultats étaient tout à fait différents, dans la mesure où après six heures, il y avait une baisse du nombre de globules rouges (p < 0.05) et cette réduction était plus significative après 24 heures (p < 0,001).
DISCUSSION
L’analyse urinaire est l’un des tests les plus demandés en médecine clinique. Par conséquent, la collecte du matériel et l’analyse doivent être appropriées afin que des résultats précis puissent être obtenus, contribuant ainsi au diagnostic, au traitement et/ou au suivi du patient(6, 10).
La phase pré-analytique est d’une importance capitale dans tous les tests de laboratoire, y compris les examens d’urine. Dans le cadre de l’analyse de l’AEC, certaines directives doivent être suivies en ce qui concerne le nettoyage des organes génitaux externes, le recueil approprié du matériel et l’orientation immédiate vers le laboratoire(2, 14, 17).
L’échantillon d’urine soumis au laboratoire doit être analysé dans les deux heures au maximum après le recueil. Dans le cas où la remise et / ou l’analyse ne sont pas effectuées immédiatement, l’échantillon doit subir une méthode de conservation, soit physique (refroidissement), soit chimique (chloroforme, thymol, acide borique, entre autres) (2, 16). La réfrigération est la méthode de conservation la plus appliquée dans les laboratoires cliniques et elle est capable d’empêcher la décomposition bactérienne. Selon Strasinger & Di Lorenzo(17), la réfrigération n’interfère pas avec les tests chimiques, préserve la cellularité et empêche la croissance bactérienne. Ce résultat a été confirmé dans la présente étude, dans la mesure où tant les patients présentant des valeurs négatives pour les tests chimiques (n = 45) que ceux dont les réactions positives ont été détectées (n = 35) n’ont présenté aucune modification de l’examen chimique après un stockage sous réfrigération. Néanmoins, la littérature décrit que le refroidissement peut entraîner une augmentation de la densité évaluée par densitomètre urinaire(16, 17). Cette donnée a été corroborée par l’expérience, qui a également varié en fonction de la densité des échantillons refroidis, dans la mesure où six d’entre eux ont indiqué une augmentation de ce paramètre.
A l’inverse, les échantillons conservés à température ambiante ont subi des modifications dans les examens chimiques, à savoir une augmentation de la présence de nitrite et une diminution des échantillons contenant des leucocytes et du glucose (tableau 2). L’augmentation du nitrite est en corrélation avec le métabolisme bactérien dans le sédiment urinaire, ce qui est également observé dans le matériel maintenu à température ambiante pendant la sédimentoscopie. L’étude de Santos et al.(15) souligne également la croissance bactérienne dans l’urine lorsque l’échantillon n’est pas analysé immédiatement ou effectué sans l’utilisation de méthodes de conservation.
Comme l’ont noté Silva et al.(16), certains échantillons maintenus à température ambiante pendant une période prolongée et sans conservateurs ont démontré une augmentation du pH (tableau 3), de la turbidité (figure 2) et une désintégration des globules rouges et des plâtres.
En revanche, le refroidissement n’a montré aucun changement significatif dans le nombre d’échantillons d’urine avec des bactéries, des leucocytes et des érythrocytes, prouvant ainsi qu’il s’agit d’une excellente méthode pour de telles analyses.
En outre, l’étude a montré une précipitation des cristaux dans la plupart des échantillons refroidis, ce qui peut gêner l’examen microscopique du sédiment, comme décrit dans la littérature(16, 17).
Dans l’expérience présente, le cristal d’urate amorphe était fréquemment présent dans les échantillons après le refroidissement. Initialement, seuls deux échantillons le présentaient. Après une période de réfrigération de six heures, il était présent dans six échantillons. À la fin de l’expérience, il était présent dans quinze d’entre eux (tableau 4). Cependant, selon Machado et al.(11), la présence de ces cristaux n’a généralement aucune pertinence clinique, bien qu’elle puisse interférer avec l’observation microscopique des éléments formés lorsqu’ils sont en grande quantité.
Pour ce qui est de la présence de cristaux d’acide urique dans l’urine, on a constaté une augmentation considérable dans les échantillons refroidis à partir de 12 heures de stockage (tableau 4). Ce cristal peut être détecté chez les patients atteints de leucémie, du syndrome de Lesch-Nyhan et chez certains patients atteints d’arthrite goutteuse(17).
Les cristaux d’oxalate et de phosphate de calcium faisaient partie des cristaux les plus fréquemment détectés ici, tant dans les échantillons à température ambiante que dans ceux majoritairement refroidis (tableau 4). Ces cristaux sont généralement présents dans l’urine de patients souffrant d’empoisonnement chimique, d’utilisation de fortes doses d’acide ascorbique et également d’ingestion d’aliments riches en acide oxalique(6, 11, 14). Bien que l’on accorde peu d’importance au rôle des cristaux d’oxalate et de phosphate de calcium dans le diagnostic des calculs rénaux(17), ce fait peut conduire à une mauvaise interprétation quant au risque de développer une lithiase rénale, dans la mesure où l’oxalate de calcium peut représenter jusqu’à 80 % des cas de néphrolithiase dans le monde(6, 12).
Comme indiqué précédemment, les échantillons refroidis ont été ramenés à température ambiante afin de pouvoir être examinés, comme le recommande la littérature(16). Selon Aguilar- Vallejo et al.(1), les cristaux présents dans les échantillons en raison de la réfrigération avaient tendance à se redissoudre dans l’urine après avoir été remis à température ambiante. Les données recueillies ici n’ont pas corroboré la littérature précédente. Dans cette étude, les cristaux sont restés présents lorsque les échantillons ont été remis à température ambiante à tous les intervalles de temps.
Analyse de la pyurie et de l’hématurie quantitatives
Les données quantitatives concernant la pyurie et l’hématurie confirment également les conclusions de Silva et al.(16). Dans l’analyse quantitative des érythrocytes, lorsque les échantillons n’étaient pas refroidis, il y avait une diminution significative après six heures de l’analyse initiale (p < 0,05 ) alors que dans les leucocytes conservés dans les mêmes conditions, il y avait une réduction significative seulement 24 heures après le prélèvement (p < 0.05) (Figure 3).
En soumettant ces échantillons à un stockage réfrigéré, les érythrocytes ont été préservés jusqu’à 12 heures après le prélèvement, montrant une réduction significative de l’hématurie seulement 24 heures après l’analyse initiale (p < 0,01 ). En ce qui concerne la pyurie, la réduction n’était statistiquement significative dans aucune des périodes analysées (Figure 3).
Dans cette enquête, il a été démontré que les tests chimiques, la cellularité (pyocytes) et la bactériurie des échantillons conservés sous réfrigération n’ont pas changé (sauf les érythrocytes dans la période de conservation de 24 heures), confirmant l’importance de cette méthode dans la conservation de l’urine. Cependant, la précipitation des cristaux était évidente en tant que variation pré-analytique entre 2 et 8ºC.
Considérant les résultats obtenus, si la réfrigération des échantillons d’urine est nécessaire, il est impératif que les conditions de stockage de l’échantillon et les conséquences possibles du processus de dépistage de l’AEC soient incluses dans le rapport d’analyse.
REMERCIEMENTS
À la professeure Luanda Thais Mendonça Santos, MA en linguistique, qui a contribué à la révision critique du texte.
2. ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE NORMAS TÉCNICAS. Laboratório clínico : requisitos e recomendações para o exame da urina. Rio de Janeiro, p. 10, 2005.
7. COSTA, M. A. et al. Comparação dos resultados obtidos pelos métodos de contagem por campo e contagem de Addis modificada utilizados para a análise do sedimento urinário. Rev Bras An Clin, v. 38, n. 4, p. 224-9, 2006.
10. HIREN, P. P. The abnormal urinalysis. Pediatr Clin N Am, v. 53, p. 325-37, 2006.
13. SAMPAIO, F. J. B. ; FILHO, G. D. B. Guide pratique d’urologie, 2000. Cap. 18.
14. SANCHES, C. A. B. et al. PALC standard version 2010. Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/Medicina Laboratorial. Rio de Janeiro : Milograph Gráfica e editora LTDA, 2010.
17. STRASINGER,S. K. ; DILORENZO, M. S. Urinalysis and body fluids. 3. Ed. São Paulo : Editorial Premier, 2009.