ARTICOLO ORIGINALE
La conservazione dell’urina sotto refrigerazione preserva il campione nelle analisi chimiche, analisi di cellularità e batteriuria di ACS
Armazenamento da urina, sob refrigeração, preserva a amostra nas análises químicas, celularidade e bacteriuria no EAS
Karen Cristina Barcellos RibeiroI; Bruno Rotondo Levenhagem SerabionII; Eduardo Lima NolascoIII; Chislene Pereira VanelliIV; Harleson Lopes de MesquitaV; José Otávio do Amaral CorrêaVI
Farmacista presso l’Hospital Universitário Sul Fluminense
IIGraduate in Farmacia dall’Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF)
Il dottorando in Scienze Farmaceutiche presso il Laboratorio di Immunoendocrinologia- Dipartimento di Analisi Clinica e Tossicologica Facoltà di Scienze Farmaceutiche- Universidade de São Paulo (USP)
IVNutrizionista clinica presso Centro de Tratamento de Doenças Renais e Fundação Imepem; Studente di master in salute brasiliana all’UFJF
VMSc in analisi clinica all’Universidade Santo Amaro (UNISA); professore aggiunto alla Faculdade Suprema; dottorando in Salute Brasiliana presso l’UFJF
VIPhD in Patologia presso l’Universidade Federal Fluminense (UFF); professore aggiunto e coordinatore del Corso di Farmacia presso l’UFJF
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ABSTRACT
INTRODUZIONE: L’analisi dei costituenti e dei sedimenti anomali delle urine (ACS) comprende test di grande valore diagnostico e prognostico nella pratica clinica. Quando l’analisi degli ACS non può essere eseguita entro due ore dalla raccolta, il campione deve essere conservato per evitare interferenze preanalitiche. La refrigerazione è la tecnica più applicata grazie alla sua economicità. Inoltre, presenta meno inconvenienti rispetto alla conservazione chimica. Tuttavia, i cambiamenti di ACS possono verificarsi anche nei campioni sotto refrigerazione.
OBIETTIVO: Analizzare l’influenza della refrigerazione a 2-8ºC sulla conservazione di campioni di urina entro 24 ore.
MATERIALE E METODO: Un totale di 80 campioni di urina sono stati selezionati da pazienti ricoverati all’ospedale universitario Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF), che sono stati analizzati per l’ACS a temperatura ambiente e conservati sotto refrigerazione per 6, 12 e 24 ore.
RISULTATI: I risultati hanno mostrato che la refrigerazione si è rivelata efficace rispetto ai campioni conservati a temperatura ambiente, in quanto le caratteristiche fisiche, chimiche, microbiche e di cellularità sono state conservate. Tuttavia, la cristalluria era presente dopo un periodo di conservazione di 6 ore.
CONCLUSIONE: I test hanno rivelato che il raffreddamento ha preservato la cellularità e le caratteristiche chimiche dei campioni di urina fino a 12 ore. Tuttavia, la precipitazione di cristalli era evidente in questo metodo di conservazione. Pertanto, le possibili conseguenze della conservazione dei campioni di urina per il test ACS in queste condizioni dovrebbero essere incluse nel rapporto di analisi.
Parole chiave: analisi delle urine; conservazione delle urine; cristalluria; piuria; ematuria Introduzione.
RESUMO
INTRODUÇÃO: L’elemento anormale delle urine e la sedimentoscopia (EAS) comprendono test di grande valore diagnostico e prognostico nella pratica clinica. Quando l’analisi EAS non può essere eseguita entro due ore dalla raccolta del campione, il campione deve essere conservato in modo da evitare interferenze preanalitiche. La refrigerazione è la tecnica più utilizzata per la sua economicità e perché presenta meno inconvenienti rispetto ai conservanti chimici. Tuttavia, i cambiamenti nell’EAS possono verificarsi anche nel campione sotto refrigerazione.
OBIETTIVO: analizzare l’influenza della refrigerazione tra 2 e 8°C sulla conservazione dell’EAS per un periodo fino a 24 ore.
MATERIALE E METODI: Ottanta campioni di urina sono stati selezionati da pazienti ricoverati nell’ospedale dell’Università Federale di Juiz de Fora (UFJF) testati per l’EAS a temperatura ambiente e conservati sotto refrigerazione a 6, 12 e 24 ore.
RISULTATI: I risultati hanno mostrato che la refrigerazione era efficace rispetto ai campioni tenuti a temperatura ambiente, poiché le caratteristiche fisiche, chimiche, cellulari e del microbiota delle urine erano conservate. Tuttavia, la cristalluria era presente a partire da 6 ore di conservazione.
CONCLUSIONE: I test hanno dimostrato che la refrigerazione ha conservato le caratteristiche chimiche e la cellularità dell’urina fino a 12 ore. Tuttavia, la precipitazione dei cristalli era evidente in questo metodo di conservazione. Così, il suggerimento di riportare nel rapporto le possibili conseguenze di questa forma di conservazione delle urine per EAS può essere importante….
Uniterms: uroanalisi; conservazione delle urine; cristalluria; piuria; ematuria.
INTRODUZIONE
L’esame delle urine di routine o analisi delle urine è uno strumento di laboratorio vitale nella pratica clinica. Uno dei più importanti test di analisi delle urine è lo screening dei costituenti anormali e del sedimento (ACS). Il test ACS comprende l’analisi fisica (caratteristiche organolettiche, volume e densità), chimica e microscopica del sedimento urinario (2, 5, 7). Si tratta di un test poco costoso e comunemente disponibile, che fornisce una notevole quantità di informazioni utili per la diagnosi di disturbi del metabolismo e del tratto genitourinario(1, 3).
Diverse condizioni cliniche sistemiche che possono influenzare la funzione renale e/o modificare la composizione delle urine, ovvero lo stato di idratazione, la progressione e la diagnosi di diabete, epatopatia, anemia emolitica o intossicazione, possono avere maggiori possibilità di essere diagnosticate e/o monitorate dall’analisi ACS(2, 4-6). Inoltre, la valutazione dell’ACS è fondamentale per individuare malattie del sistema renale e urogenitale come la glomerulonefrite, la sindrome nefrosica, la cistite, la pielonefrite, l’insufficienza renale, la litiasi e persino il cancro(2, 6).
Nei laboratori di patologia clinica, tutte le procedure di analisi, compresi i test delle urine, sono divise in fasi pre-analitiche, analitiche e post-analitiche(8, 17). La fase preanalitica è la fase in cui sono necessarie procedure fondamentali per garantire la qualità e le prestazioni del servizio. Comprende la raccolta, la manipolazione, il trattamento, la consegna del campione agli analizzatori e la conservazione quando non viene trattato all’arrivo in laboratorio. Inoltre, rappresenta dal 46% al 70% degli errori di laboratorio, che possono portare a risultati imprecisi, ostacolando così la diagnosi clinica e l’assistenza sanitaria del paziente(8, 9, 11, 18).
Pertanto, la raccolta delle urine (fase preanalitica) dovrebbe seguire le procedure di base per ottenere un campione che rifletta i cambiamenti fisico-chimici, cellulari e microbiologici(2, 7). Idealmente, il campione dovrebbe essere raccolto dopo la pulizia del tratto genitourinario attraverso l’urina spontanea e preferibilmente lunga a metà percorso dopo la concentrazione notturna (prima minzione del mattino). L’invio e l’analisi del campione dovrebbero avvenire entro due ore dalla raccolta se conservato a temperatura ambiente(7, 12).
Secondo l’Associazione Brasiliana delle Norme Tecniche (Associação Brasileira de Normas Técnicas- ABNT)(2), quando l’analisi non può essere eseguita entro questo periodo, dovrebbero essere utilizzati dei conservanti per conservare le caratteristiche dell’urina e prevenire risultati di analisi imprecisi. I principali fattori direttamente o indirettamente legati alle condizioni del paziente che sono in grado di modificare i risultati dell’analisi AES sono i seguenti: farmaci, vitamine, esercizi fisici, dieta e cattiva conservazione del campione(2, 5).
Molte situazioni non consentono l’analisi entro due ore dalla minzione, quindi la conservazione del campione di urina diventa una fase preanalitica comunemente applicata per evitare le interferenze precedentemente menzionate. Ci sono diversi conservanti che offrono vantaggi e svantaggi: acido borico, cloroformio, fenolo, formalina, toluene, timolo e refrigerazione a 2-8ºC, che è il metodo più ampiamente applicato(2, 7, 13) grazie alla sua economicità e ai minori svantaggi rispetto ai conservanti chimici(2, 12, 13).
L’uso della refrigerazione può portare a cambiamenti nell’ACS che includono densità, precipitazione di cristalli e persino alterazioni cellulari(2, 13, 15). Inoltre, la durata del periodo di raffreddamento è controversa, in quanto alcuni autori sostengono che sia di 12 ore(2), mentre altri raccomandano fino a 24 ore(12).
OBIETTIVI
Il presente studio aveva lo scopo di verificare l’influenza della refrigerazione a 2-8ºC sulla conservazione delle urine per 24 ore prima dell’analisi ACS. I campioni refrigerati sono stati confrontati con quelli conservati a temperatura ambiente per l’esecuzione di analisi ACS fisiche, chimiche e microscopiche.
MATERIALE E METODO
Paziente e campioni
I campioni di urina sono stati ottenuti da pazienti adulti di età compresa tra i 18 e i 60 anni di entrambi i sessi, ricoverati presso l’Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF) – ospedale universitario e che avevano richieste di test ACS.
80 campioni di urina contenenti 80 ml ciascuno provenivano da raccolta unica di urina a flusso medio pulita dopo concentrazione notturna. Sono stati conservati in contenitori standardizzati dall’Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) e spediti immediatamente al settore di analisi delle urine del Laboratorio di Analisi Cliniche dell’Ospedale Universitario UFJF e analizzati all’arrivo.
Dopo l’esecuzione del test ACS, i campioni sono stati divisi e conservati a diverse temperature (refrigerazione a 2-8ºC e a temperatura ambiente). Inoltre, sono stati valutati a diversi periodi (6, 12 e 24 ore).
Tutte le procedure di ricerca sono state approvate dal Comitato Etico e di Ricerca dell’UFJF – Hospital Universitário – Centro de Atenção à Saude (numero: 0085.0.420.000-10). Il laboratorio ha un controllo di qualità esterno secondo gli standard della Società Brasiliana di Patologia Clinica (Sociedade Brasileira de Patologia Clínica).
Conservazione
Dopo l’esecuzione del test ACS all’arrivo immediato, il volume di urina rimanente (70 ml) è stato diviso in due fiale che sono state conservate per 24 ore seguendo procedure diverse: una è stata conservata in frigorifero e l’altra a temperatura ambiente. La temperatura del frigorifero è stata regolata tra i 2 e gli 8ºC con controllo del tempo tramite termometro massimo e minimo durante tutto l’esperimento. Il test ACS è stato eseguito nuovamente.
ACS
Una volta raccolto il materiale, l’aliquota di 10 ml di urina è stata applicata per l’analisi. L’esame fisico è stato effettuato osservando il colore, la densità, l’aspetto e l’odore. La densità è stata valutata con l’uso di un rifrattometro, che è stato sottoposto a calibrazione con acqua distillata dopo ogni analisi.
L’analisi chimica è stata eseguita con l’aiuto di strisce reagenti (UriquestPlus®) per rilevare la presenza di leucociti, nitriti, proteine, sangue, bilirubina, urobilinogeno, corpo chetonico, glucosio e controllo del pH. Dopo l’omogeneizzazione, le aree reagenti sono state immerse nell’urina fresca e immediatamente rimosse per evitare la dissoluzione del reagente dalla striscia. Mentre la striscia veniva ritirata dall’urina, l’eccesso veniva drenato per evitare il mescolamento delle sostanze chimiche. Il tempo specifico di reazione per ogni parametro analizzato è stato osservato e, successivamente, è stato attentamente confrontato con l’etichetta del prodotto.
Una volta condotta l’analisi chimica, è stata eseguita la microscopia utilizzando un comune microscopio ottico, seguita dalla centrifugazione di 10 ml di urina a 1.500 rpm per 5 minuti. In seguito, il surnatante è stato rimosso e il sedimento è stato risospeso e trasferito su un vetrino. Dopo di che, si è proceduto all’analisi microscopica a 100 × 400 e ×. Il sedimento è stato valutato per verificare la presenza di elementi come cristalli, muco, gesso renale, cellule, batteri e lieviti tra gli altri. Le suddette procedure sono state adottate in tutte le analisi dei campioni ed eseguite dopo 6, 12 e 24 ore. Vale la pena menzionare in particolare che i campioni refrigerati hanno raggiunto la temperatura ambiente prima di essere manipolati in ciascuna di queste fasi.
Piuria ed ematuria valutate in ACS
Venti campioni di urina che hanno mostrato più di cinque piociti e/o globuli rossi / campo microscopico sono stati selezionati per valutare la piuria e l’ematuria. Di conseguenza, 10 ml di urina sono stati centrifugati a 1500 rpm per 5 minuti. Senza agitare e senza risospendere il sedimento, i 9 ml superiori sono stati rimossi e il restante 1 ml è stato omogeneizzato e posto nella camera di Newbauer. In seguito, i piociti e i globuli rossi sono stati contati come descritto in letteratura(17). Il risultato è stato rilasciato con il numero di globuli rossi o piociti/ml. Sia il test ACS che la quantificazione dei piociti e dei globuli rossi sono stati eseguiti da tre analisti addestrati, che hanno adottato gli stessi criteri.
Analisi statistica
Le procedure statistiche sono state utilizzate utilizzando il software Graph Pad Prism, versione 5.0, mediante analisi della varianza (ANOVA), seguita dal test di Tukey, con livello di significatività del 5%. I dati sono stati espressi come media ± errore standard della media (SEM).
RISULTATI
Inzialmente, sono state effettuate le analisi fisiche (colore, aspetto e densità) di 80 campioni di urina. La figura 1 mostra che i campioni di urina a temperatura ambiente e quelli refrigerati non mostravano praticamente alcuna differenza in termini di colore. Tuttavia, dopo 24 ore a temperatura ambiente, quattro campioni hanno cambiato la loro tonalità da giallo a giallo scuro (3) e rosso (1).
Per quanto riguarda l’aspetto (Figura 2), 38 degli 80 campioni di urina, che erano stati tenuti a temperatura ambiente, erano chiari al momento della raccolta e 31 sono rimasti con lo stesso aspetto per tutto il periodo dell’analisi. I restanti 7 campioni sono diventati torbidi nelle analisi effettuate dopo 24 ore. Un risultato completamente diverso è stato osservato nei campioni conservati sotto refrigerazione. In questo metodo di conservazione, si è osservato che dopo un periodo di refrigerazione di sei ore alcuni campioni sono diventati torbidi o leggermente torbidi, nonostante il fatto che la maggior parte di essi sia rimasta chiara. Nelle analisi effettuate 12 e 24 ore dopo la raccolta, c’era un’inversione del profilo con la predominanza di caratteristiche torbide e leggermente torbide. Pertanto, al tempo zero, 38 campioni erano limpidi e solo 11 campioni presentavano questa caratteristica alla fine del periodo di refrigerazione di 24 ore.
Per quanto riguarda l’analisi della densità, si è osservato che tutti i campioni, refrigerati o no, hanno dato risultati entro 1,005 e 1,035. 9 degli 80 campioni conservati a temperatura ambiente hanno dimostrato un aumento massimo di 0,010 unità. Per quanto riguarda i campioni conservati sotto refrigerazione, solo 3 hanno mostrato un aumento della densità di 0,005.
Nella valutazione chimica, è stato osservato che 45 degli 80 campioni di urina selezionati non hanno mostrato alcun cambiamento chimico rilevato dalla striscia reagente quando analizzati a temperatura ambiente al momento della raccolta. Anche dopo la refrigerazione, questi 45 campioni non hanno presentato alcun cambiamento chimico, confermando i dati presentati durante questo studio. Quindi, la refrigerazione non ha esercitato alcun effetto sull’analisi chimica, che potrebbe portare alla positività.
Nei restanti 35 campioni, uno o più elementi anomali sono stati rilevati sulle strisce reattive subito dopo la raccolta (Tabella 1). In questi campioni con cambiamenti chimici, che erano stati conservati sotto refrigerazione e analizzati dopo 6, 12 e 24 ore, non c’era nessun cambiamento qualitativo o semi-quantitativo nello screening in contrasto con l’analisi all’arrivo in laboratorio.
Per quanto riguarda i campioni conservati a temperatura ambiente, la tabella 2 mostra i cambiamenti in alcuni parametri chimici in contrasto con i risultati ottenuti da quelli immediatamente analizzati. Nell’analisi dopo 24 ore, i tre campioni hanno iniziato a mostrare una reazione positiva ai nitriti, due erano negativi per i leucociti e uno era negativo per il glucosio.
Per quanto riguarda il pH degli 80 campioni conservati sotto refrigerazione e valutati con le strisce reattive, c’è stato un cambiamento del pH da 6,0 a 7,0 in un solo campione. Al contrario, nei campioni conservati a temperatura ambiente (tabella 3), c’è stato un cambiamento in 9 di essi, principalmente 24 ore dopo la raccolta.
Dopo le analisi fisiche e chimiche, lo screening ACS degli elementi formati nei campioni di urina refrigerati non ha rivelato differenze nei risultati di cellule epiteliali, conta dei piociti, eritrociti e batteri in relazione ai campioni valutati al momento della raccolta.
Tuttavia, durante l’analisi qualitativa e semiquantitativa è stato osservato un aumento dei cristalli dei sedimenti urinari proporzionale al periodo di raffreddamento, soprattutto cristalli di ossalato di calcio, urati e fosfato amorfo (tabella 4). Inizialmente, solo 7 campioni su 80 presentavano cristalli. Alla fine del periodo di raffreddamento di 24 ore, 36 campioni di urina hanno mostrato cristalli precipitati e diversi con più di un tipo di cristallo. Quando sono stati tenuti a temperatura ambiente per 24 ore, il numero di campioni con cristalli al momento della raccolta è cambiato da 7 a 10 con precipitazione di cristalli.
Per quanto riguarda l’urina conservata a temperatura ambiente, l’analisi della piuria al microscopio ha rivelato che il numero di cellule è diminuito durante il periodo di 12 ore. Inizialmente, 6 campioni presentavano da 5 a 10 piociti/campo e solo 3 sono rimasti con lo stesso numero alla fine del periodo di 24 ore. 6 degli 8 campioni di urina che presentavano da 10 a 20 piociti/campo sono rimasti con la stessa conta dopo 12 ore e questo totale è sceso a 5 campioni alla fine del periodo di 24 ore.
Per quanto riguarda l’ematuria, 10 campioni hanno mostrato valori superiori a 4 eritrociti/campo, che è stabilito come valore normale nel laboratorio clinico dell’ospedale universitario. Questo è stato corroborato dai risultati delle strisce di urina che hanno mostrato 9 campioni positivi. Quando i campioni sono stati tenuti a temperatura ambiente e analizzati dopo 6 ore, si è osservato un calo significativo dell’ematuria, in quanto solo 2 dei 5 campioni contenenti 5-10 eritrociti rossi/campo sono rimasti con lo stesso numero. Negli altri campioni di urina con risultati che andavano da più di 10/campo fino a numerosi eritrociti/campo, c’era anche un numero considerevolmente inferiore dopo le prime sei ore. Questa riduzione non è stata osservata nei campioni di urina conservati sotto refrigerazione anche dopo 24 ore.
Nei campioni conservati a temperatura ambiente, 10 campioni hanno mostrato una batteriuria significativa dopo 12 ore, arrivando a 14 campioni dopo 24 ore, mentre gli 8 campioni di urina che inizialmente presentavano batteri non hanno subito alcun cambiamento.
I risultati dell’analisi quantitativa dei piociti hanno rivelato che non c’erano cambiamenti statisticamente significativi (p > 0,05) nei campioni tenuti sotto refrigerazione, anche dopo 24 ore rispetto ai conteggi ottenuti nei campioni di urina analizzati al momento della raccolta. Se conservati a temperatura ambiente, i campioni di urina analizzati presentavano una riduzione significativa (p < 0,05) della conta dei piociti solo dopo 24 ore dalla raccolta (Figura 3).
Abbiamo anche eseguito un’analisi quantitativa dei globuli rossi (Figura 4) conservati sotto refrigerazione e c’era una riduzione sostanziale (p < 0,01) solo dopo 24 ore. Nei campioni che sono stati conservati per 24 ore senza refrigerazione, i risultati sono stati molto diversi, nella misura in cui dopo sei ore c’era un calo della conta dei globuli rossi (p < 0.05) e questa riduzione era più significativa dopo 24 ore (p < 0.001).
DISCUSSIONE
L’analisi è uno dei test più richiesti in medicina clinica. Pertanto, la raccolta del materiale e l’analisi devono essere appropriate, in modo che si possano ottenere risultati accurati, aiutando così la diagnosi, il trattamento e/o il monitoraggio del paziente (6, 10).
La fase preanalitica è di fondamentale importanza in tutti i test di laboratorio, compresi gli esami delle urine. Nell’analisi ACS, si devono seguire alcune linee guida per quanto riguarda la pulizia dei genitali esterni, la raccolta adeguata del materiale e l’immediato invio al laboratorio(2, 14, 17).
Il campione di urina sottoposto al laboratorio deve essere analizzato al massimo entro due ore dalla raccolta. Nel caso in cui la consegna e/o l’analisi non vengano effettuate immediatamente, il campione deve essere sottoposto a qualche metodo di conservazione, sia fisico (raffreddamento) che chimico (cloroformio, timolo, acido borico, tra gli altri) (2, 16). La refrigerazione è il metodo di conservazione più applicato nei laboratori clinici ed è in grado di prevenire la decomposizione batterica. Secondo Strasinger & Di Lorenzo(17), la refrigerazione non interferisce con i test chimici, conserva la cellularità e impedisce la crescita batterica. Questo risultato è stato confermato qui, in quanto sia i pazienti con valori negativi ai test chimici (n = 45) che quelli con reazioni positive rilevate (n = 35) non hanno presentato alcun cambiamento nell’esame chimico dopo la conservazione sotto refrigerazione. Tuttavia, la letteratura descrive che il raffreddamento può provocare un aumento della densità valutata dal densitometro delle urine(16, 17). Questo dato è stato corroborato dall’esperimento, che ha anche variato in relazione alla densità dei campioni raffreddati, in quanto sei di essi hanno indicato un aumento di questo parametro.
Conversamente, i campioni conservati a temperatura ambiente hanno subito cambiamenti nell’esame chimico, vale a dire un aumento della presenza di nitrito e una diminuzione nei campioni con leucociti e glucosio (Tabella 2). L’aumento del nitrito è correlato al metabolismo batterico nel sedimento urinario, che è ugualmente osservato nel materiale mantenuto a temperatura ambiente durante la sedimentoscopia. Lo studio di Santos et al.(15) sottolinea anche la crescita batterica nelle urine quando il campione non viene analizzato immediatamente o viene eseguito senza l’uso di metodi di conservazione.
Come notato da Silva et al.(16), alcuni campioni mantenuti a temperatura ambiente per un periodo prolungato e senza conservanti hanno dimostrato un aumento del pH (Tabella 3), torbidità (Figura 2) e disintegrazione di globuli rossi e calchi.
Al contrario, il raffreddamento non ha mostrato cambiamenti significativi nel numero di campioni di urina con batteri, leucociti ed eritrociti, dimostrando di essere un ottimo metodo per tali analisi.
Inoltre, lo studio ha mostrato la precipitazione di cristalli nella maggior parte dei campioni raffreddati, che può ostacolare l’esame microscopico del sedimento, come descritto in letteratura(16, 17).
Nel presente esperimento, il cristallo amorfo di urato era spesso presente nei campioni dopo il raffreddamento. Inizialmente, solo due campioni lo mostravano. Dopo un periodo di refrigerazione di sei ore, era presente in sei campioni. Alla fine dell’esperimento, era presente in quindici di essi (tabella 4). Tuttavia, secondo Machado et al.(11), la presenza di questi cristalli di solito non ha rilevanza clinica, anche se può interferire con l’osservazione microscopica degli elementi formati quando sono in grandi quantità.
Per quanto riguarda la presenza di cristalli di acido urico nelle urine, c’è stato un notevole aumento nei campioni raffreddati a partire da 12 ore di conservazione (Tabella 4). Questo cristallo può essere rilevato in pazienti con leucemia, sindrome di Lesch-Nyhan e in alcuni pazienti con artrite gottosa(17).
I cristalli di ossalato e di fosfato di calcio sono stati tra i più comunemente rilevati sia nei campioni a temperatura ambiente che in quelli più raffreddati (Tabella 4). Questi cristalli sono solitamente presenti nelle urine di pazienti con avvelenamento chimico, uso di alte dosi di acido ascorbico e anche ingestione di cibi ricchi di acido ossalico(6, 11, 14). Anche se viene data poca importanza al ruolo dei cristalli di ossalato e di fosfato di calcio nella diagnosi dei calcoli renali(17), questo fatto può portare a un’errata interpretazione del rischio di sviluppare una litiasi renale, nella misura in cui il calcio ossalato può rappresentare fino all’80% dei casi di nefrolitiasi in tutto il mondo(6, 12).
Come detto in precedenza, i campioni raffreddati sono stati riportati a temperatura ambiente per poter essere esaminati, come consigliato in letteratura(16). Secondo Aguilar- Vallejo et al.(1), i cristalli presenti nei campioni a causa della refrigerazione tendevano a ridissolversi nelle urine dopo essere stati riportati a temperatura ambiente. I dati qui raccolti non confermano la letteratura precedente. In questo studio, i cristalli sono rimasti presenti quando i campioni sono stati riportati a temperatura ambiente in tutti gli intervalli di tempo.
Analisi quantitativa della piuria e dell’ematuria
I dati quantitativi riguardanti la piuria e l’ematuria supportano anche i risultati di Silva et al.(16). Nell’analisi quantitativa degli eritrociti, quando i campioni non sono stati raffreddati, c’è stata una diminuzione significativa dopo sei ore dall’analisi iniziale (p < 0.05 ) mentre nei leucociti tenuti nelle stesse condizioni, c’è stata una riduzione significativa solo 24 ore dopo la raccolta (p < 0.05) (Figura 3).
Sottoponendo questi campioni a conservazione refrigerata, gli eritrociti sono stati conservati fino a 12 ore dopo la raccolta, mostrando una riduzione significativa dell’ematuria solo 24 ore dopo l’analisi iniziale (p < 0.01 ). Per quanto riguarda la piuria, la riduzione non è stata statisticamente significativa in nessuno dei periodi analizzati (Figura 3).
In questa indagine, è stato dimostrato che i test chimici, la cellularità (piociti) e la batteriuria dei campioni conservati sotto refrigerazione non sono cambiati (tranne gli eritrociti nel periodo di conservazione di 24 ore), confermando l’importanza di questo metodo nella conservazione delle urine. Tuttavia, la precipitazione di cristalli era evidente come variazione pre-analitica a 2-8ºC.
Considerando i risultati ottenuti, se la refrigerazione dei campioni di urina è richiesta, è imperativo che le condizioni in cui il campione è stato conservato e le possibili conseguenze del processo di screening ACS siano incluse nel rapporto di analisi.
Riconoscimenti
Al professor Luanda Thais Mendonça Santos, MA in linguistica, che ha contribuito alla revisione critica del testo.
2. ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE NORMAS TÉCNICAS. Laboratório clínico: requisitos e recomendações para o exame da urina. Rio de Janeiro, p. 10, 2005.
7. COSTA, M. A. et al. Comparação dos resultados obtidos pelos métodos de contagem por campo e contagem de Addis modificada utilizados para a análise do sedimento urinário. Rev Bras An Clin, v. 38, n. 4, p. 224-9, 2006.
10. HIREN, P. P. L’analisi delle urine anormale. Pediatr Clin N Am, v. 53, p. 325-37, 2006.
13. SAMPAIO, F. J. B.; FILHO, G. D. B. Guida pratica di urologia, 2000. Tappo. 18.
14. SANCHES, C. A. B. et al. PALC versione standard 2010. Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/Medicina Laboratoriale. Rio de Janeiro: Milograph Gráfica e editora LTDA, 2010.
17. STRASINGER,S. K.; DILORENZO, M. S. Analisi delle urine e dei fluidi corporei. 3. Ed. San Paolo: Editorial Premier, 2009.