Successful nuclear DNA profiling of rootless hair shafts: a novel approach

Historicamente, as amostras de hastes capilares sem raiz submetidas a um laboratório forense para análise de DNA são reservadas para análise de DNA mitocondrial (mtDNA) devido à presença de DNA altamente degradado, bem como de quantidades insuficientes de DNA nuclear. Embora o mtDNA tenha sido muito bem sucedido na obtenção de resultados de cabelos sem raiz, este sistema tem as suas limitações, nomeadamente, é um marcador de linhagem que não consegue diferenciar os genótipos relacionados com a maternidade. Dada a elevada incidência de pêlos como prova forense, há necessidade da utilização de um sistema de teste de ADN nuclear capaz de produzir resultados fiáveis para a prova forense da haste capilar. Este estudo relata a utilização de uma metodologia melhorada de extracção de ADN para cabelos, em combinação com um ensaio de tipagem de ADN nuclear recentemente desenvolvido, InnoTyper® 21, para melhorar a taxa de sucesso na obtenção de resultados informativos a partir de amostras forenses altamente comprometidas, degradadas, e com vestígios, tais como hastes de cabelo sem raiz. O kit InnoTyper 21 é um pequeno sistema de tipagem de marcadores de retrotransposão amplicon compatível com as plataformas de electroforese capilar actualmente utilizadas. Este sistema contém 20 marcadores de elementos de Alu, de tamanho entre 60 e 125 bp, tornando o ensaio altamente sensível para amostras forenses extremamente degradadas e permitindo assim a recuperação de perfis de ADN nuclear a partir de amostras que de outra forma exigiriam sequenciação de mtDNA. Um subconjunto de amostras foi também testado com o kit GlobalFiler com menos sucesso devido aos maiores tamanhos de amplicon em comparação com o InnoTyper 21. Os resultados foram variáveis mas muito promissores, com aproximadamente 40% do número total de cabelos testados produzindo perfis de ADN nuclear interpretáveis com o InnoTyper 21. Estes resultados demonstram a capacidade das metodologias utilizadas para produzir resultados de ADN nuclear com elevado poder estatístico a partir de hastes de cabelo sem raiz.

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